********Bienvenidos a este blog dedicado a los laboratorios de ánalisis clínico, mira videos, aprende con las presentaciones, y vota en nuestras encuestas. Un saludo.********

sábado, 31 de mayo de 2008

Disculpas

Lamento mi falta de actualizaciones en estos meses, no tuve demasiado tiempo para ello, pero volveré muy pronto con más cosas sobre este mundo.

Leer toda la nota...

domingo, 10 de febrero de 2008

Tubos de extracción- Pruebas hematológicas

Os dejo un cuadro representativo con los tubos y las pruebas más importantes en el área de hematología.








Leer toda la nota...

Colores de los tapones de los tubos de extracción

Bueno,hoy os explicaré que los tubos de extracción dependiendo de que color tenga su tapón contiene distintos tipos de sustancias, y por lo tanto son especiales para distintas pruebas.

Tapón amarillo:Tubo estéril con aditivo de ácido cítrico-dextrosa


Tapón azul: Tubo estéril con anticoagulante citrato de sodio(1/9)


Tapón negro: Tubo estéril con anticoagulante citrato de sodio(1/4)


Tapón malva: Tubo estéril con anticoagulante EDTA


Tapón verde: Tubo estéril con anticoagulante heparina sódica


Tapón rojo: Tubo estéril sin anticoagulantes ni aditivos ni geles separadores. Los tapones de colores con una banda Gris agregada indican que el tubo corresponde a uno los anteriores y que además contiene gel separador de suero o plasma.




Leer toda la nota...

domingo, 3 de febrero de 2008

Tipos de tinciones (tinción Ziehl-Nielsen)

Bueno lo prometido es deuda os dejo una presentación de como se realiza la técnica de tinción para las BAAR(bacterias acido alcohol resistentes), la tinción de Ziehl-Nielsen. Un saludo




Leer toda la nota...

sábado, 26 de enero de 2008

Tipos de tinciones (tinción gram)

Hola a todos, estos días os voy a explicar las técnicas de tinción más utilizadas en los laboratorios de ánalisis clínicos en el área de microbiología empezamos con la tinción GRAM.

Esta tinción se denominada así por el bacteriólogo danés Christian Gram, quien la desarrolló en 1844.

La tinción de Gram es uno de los métodos de tinción más importantes en el laboratorio bacteriológico y con el que el estudiante debe estar perfectamente familiarizado. Su utilidad práctica es indiscutible y en el trabajo microscópico de rutina del Laboratorio de Microbiología las referencias a la morfología celular bacteriana (cocos,bacilos,positivos,negativos, etc) se basan justamente en la tinción de GRAM.

Descripta en forma breve, la secuencia de la tinción es la siguiente: el Frotis fijado con calor se tiñe 1 min con Violeta Cristal, se lava con agua, se cubre con solución Yodada durante 1 min y se lava de nuevo con agua, decolorar con mezcla alcohol etílico/acetona. Escurrir y cubrir con Safranina (color de contraste) durante 20 seg. Lavar y secar.

Sobre la base de su reacción a la tinción de Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos, grampositivas y gramnegativas (en este caso, los términos positivo y negativo no tiene nada que ver con carga eléctrico, sino simplemente designan dos grupos morfologicos distintos de bacterias).

Las bacterias gram-positivas y gram-negativas tiñen de forma distinta debido a las diferencias contitutivas en la estructura de su pared. La pared de la célula bacteriana sirve para dar su tamaño y forma al organismo así como para prevenir la lisis osmótica. El material de la pared celular bacteriana que confiere rigidez es el peptidoglicano. La pared de la célula gram-positiva es gruesa y consiste en varias capas interconectandas de peptidoglicano así como algo de ácido teicoico. Generalmente, 80%-90% de la pared de la célula gram-positiva es peptidoglicano. La pared de la célula gram-negativa, por otro lado, contiene una capa mucho más delgada, únicamente de peptidoglicano y está rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolípidos, lipopolisacáridos, y lipoproteínas. Sólo 10% - 20% de la pared de la célula gram-negativa es peptidoglicano.

Debido a su importancia en taxonomía bacteriana y a que indica diferencias fundamentales de la pared celular de las distintas bacterias, describiremos aquí con algún detalle la tinción de Gram y las interpretaciones que actualmente se hacen sobre el porqué de su funcionamiento.

Las células fijadas al calor sobre un portaobjetos se tiñen, primero con una solución de cristal violeta (otros colorantes básicos no son tan efectivos) y son lavadas después para quitar el exceso de colorante. En este estado, todas las células, tanto las grampositivas como las gramnegativas, están teñidas de azul.

El portaobjetos se cubre entonces con una solución de yodo-yoduro potásico. El ingrediente activo es aquí el I2; el KI simplemente hace soluble el I2 en agua. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en agua con el cristal violeta. De nuevo tanto las células grampositivas como las gramnegativas se encuentran en la misma situación.

Se lleva a cabo después la decoloración, usando una mezcla de alcohol-acetona, sustancias en las que es soluble el complejo I2-cristal violeta. Algunos organismos (grampositivos) no se decoloran, mientras que otros (gramnegativos) lo hacen. La diferencia esencial entre esos dos tipos de células está por tanto en su resistencia a la decoloración; esta resistencia se debe probablemente al hecho de que en el caso de bacterias gram-negativas, la mezcla de alcohol/acetona es un solvente lipídico y disuelve la membrana exterior de la pared de la célula (y también puede dañar la membrana citoplásmica a la que se une peptidoglicano). La delgada capa de peptidoglicano es incapaz de retener el de complejo cristal violeta-yodo y la célula se decolora. Las células grampositivas, a causa de sus paredes celulares más espesas (tienen más peptidoglicano y menos lípido), no son permeables al disolvente ya que éste deshidrata la pared celular y cierra los poros, disminuyendo así el espacio entre las moléculas y provocando que el de complejo cristal violeta-yodo quede atrapado dentro de la pared celular. Después de la decoloración las células grampositivas son todavía azules, pero las gramnegativas son incoloras.

Para poner de manifiesto las células gramnegativas se utiliza una coloración de contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina básica. Después de la coloración de contraste las células gramnegativas son rojas, mientras que las grampositivas permanecen azules.

Deben destacarse algunos aspectos cruciales de la tinción de Gram:

1) El tratamiento con cristal violeta debe preceder al tratamiento con yodo. El yodo por sí solo tiene poca afinidad con las células.

2) La decoloración debe realizarse con poca agua para evitar que pierdan la tinción las células grampositivas. EI proceso de decoloración debe ser corto y es esencial un cálculo preciso del tiempo para obtener resultados satisfactorios.

3) Cultivos más viejo de 24 horas pueden perder su habilidad de retener el complejo cristal violeta - yodo.

El carácter de grampositivo no es siempre un fenómeno del todo o nada. Algunos organismos son más grampositivos que otros y algunos son gram-variables, es decir, unas veces grampositivos y otras gramnegativos.


En la imagen Bacterias Gram + (arriba) y Gram - (abajo)

Más adelante os explicaré como se realiza la tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) y la morfología de los microorganismos.

Un saludo a todos.



Leer toda la nota...

miércoles, 23 de enero de 2008

Microscopio electrónico (M.E)

Como os habia prometido anteriormente os explicaré un poco el funcionamiento de un microscopio electronico.



Un microscopio electrónico es aquél que utiliza electrones en vez de fotones o luz visible para formar imágenes de objetos diminutos. Los microscopios electrónicos permiten alcanzar una capacidad de aumento muy superior a los microscopios convencionales (hasta 500.000 aumentos comparados con los 1000 de los mejores microscopios ópticos) debido a que la longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones.


Un microscopio electrónico funciona con un haz de electrones generados por un cañón electrónico, acelerados por un alto voltaje y focalizados por medio de lentes magnéticas (todo ello al alto vacío ya que los electrones son absorbidos por el aire). Los electrones atraviesan la muestra (debidamente deshidratada) y la amplificación se produce por un conjunto de lentes magnéticas que forman una imagen sobre una placa fotográfica o sobre una pantalla sensible al impacto de los electrones que transfiere la imagen formada a la pantalla de un ordenador. Los microscópios electrónicos sólo se pueden ver en blanco y negro puesto que no utilizan la luz, pero se le pueden dar colores en el ordenador. Como se puede apreciar su funcionamiento es semejante a un monitor monocromático.



Existen dos tipos principales de microscopios electrónicos: Microscopio electrónico de transmisión Microscopio electrónico de barrido
En el estudio de los circuitos integrados se suele utilizar el microscopio electrónico debido a una curiosa propiedad: Como el campo eléctrico modifica la trayectoria de los electrones, en un circuito integrado en funcionamiento, visto bajo el microscopio electrónico, se puede apreciar el potencial al que está cada elemento del circuito.




Leer toda la nota...

lunes, 21 de enero de 2008

Microscopio óptico

Ahora os voy a explicar los 2 microscopios más utilizados el microscopio optico y el microscopio electronico.

Funcion del microscopio óptico

Las células son las unidades básicas de los seres vivos. La mayoría de ellas son de pequeño tamaño por lo que es indispensable el uso de instrumentos como los microscopios para su visualización. La exigencia del estudio de las estructuras celulares a llevado a la invencion y mejoramiento practico de esta herramienta muy utilizada en las disciplinas de la biologia y la medicina incorporandose ahora en las ciencias exactas para la caracterizacion de muestras quimicas. En la tabla sigiente se muestra el rango de resolucion comparados con otras tecnicas.











Partes del microscopio óptico y sus funciones



Sistema óptico: lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo.
Objetivo: lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de esta.
Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
Diafragma: regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
Cuerpo.
Fase Mecánica.
Control de la fase mecánica.
Control de enfoque .




Leer toda la nota...